La tryptone fournit du carbone, de l'azote, des vitamines et des minéraux. L'extrait de levure est une source de vitamines, en particulier du groupe B. Le citrate ferrique et le sulfite de sodium sont des indicateurs de H2S. Le thioglycollate de sodium est un agent réducteur. Le polysorbate 80 est un tensioactif et un émulsifiant. Le sulfate de polymixine B et la sulfadiazine inhibent les bactéries autres que Clostridia. L'agar est l'agent solidifiant. Clostridium perfringens réduit le sulfite en sulfure qui réagit avec le fer du citrate ferrique pour former un précipité noir de sulfure de fer qui noircit les colonies.